Apakah Analisis PCR?
Analisis reaksi rantai polimerase (PCR) adalah teknik makmal yang direka untuk mengenal pasti sejumlah kecil DNA dalam sampel dengan proses yang dikenali sebagai amplifikasi . Semasa penguatan PCR, DNA kepentingan disalin berulang kali sehingga cukup untuk analisis dan pengesanan. Sebagai contoh, PCR boleh digunakan untuk mengenal pasti sejumlah kecil DNA dari organisma yang menyebabkan gonorrhea atau klamidia yang terdapat dalam sampel air kencing .
Bagaimanakah Kerja PCR?
Langkah pertama dalam PCR adalah untuk memanaskan sampel supaya DNA double-stranded memisahkan menjadi dua helai tunggal - ini dipanggil denaturation . Kemudian primer , sampel pendek DNA yang sesuai dengan hujung urutan DNA yang menarik, digabungkan dengan DNA sampel. Selepas ini, polimerase DNA digunakan untuk memulakan replikasi DNA di lokasi primer. Akhir sekali, DNA dipanaskan untuk memisahkan helai sekali lagi, dan proses PCR keseluruhannya bermula sekali lagi.
Jumlah segmen DNA yang terdapat di dalam sampel meningkat secara eksponen dengan setiap kitaran PCR: satu salinan menjadi dua, kemudian menjadi empat, kemudian menjadi lapan, dan lain-lain; Secara umumnya, hanya 20 hingga 40 kitaran diperlukan untuk menentukan sama ada DNA yang dipersoalkan hadir (dan, jika ada, untuk menyediakan sampel yang mencukupi untuk analisis).
Semua langkah-langkah tindak balas rantaian polimerase - membuktikan DNA, menggunakan primer, dan memanjangkan DNA - berlaku pada suhu yang berbeza, jadi selepas campuran awal disusun, langkah-langkah boleh dikawal melalui proses yang dikenali sebagai termosbeku , di mana suhu diadakan pada tahap yang diperlukan untuk hanya cukup lama untuk setiap langkah untuk mengambil tempat.
Oleh itu, PCR adalah cara yang berkesan untuk menguatkan jumlah DNA sasaran dalam tiub ujian tunggal dengan sedikit keperluan untuk intervensi manusia.
Tinjauan rantai polimerase mewakili revolusi dalam teknik biologi apabila ia mula dibangunkan pada awal tahun 1980an, dan pencipta PCR, Kary Mullis, memenangi Hadiah Nobel dalam Kimia untuk karyanya pada tahun 1993.
Kenapa PCR Berkaitan dengan Ujian STD?
Reaksi rantai polimerase, dan teknik yang berkaitan seperti tindak balas rantai ligase , terbukti semakin penting untuk ujian STD. Ini kerana teknik ini dapat mengenal pasti secara langsung sejumlah kecil virus DNA atau RNA dalam sampel. Mengenalpasti kod genetik patogen tidak memerlukan patogen untuk hidup - seperti budaya bakteria atau budaya virus . Ia juga tidak memerlukan jangkitan yang telah berlaku dalam masa yang lama dahulu untuk orang-orang yang telah menghasilkan reaksi antibodi yang dikesan (seperti yang dikesan oleh ELISA .) Ini bermakna teknik PCR kadang-kadang boleh mengesan penyakit lebih awal daripada ujian lain, dan tanpa seperti yang perlu dibimbangkan untuk menjaga sampel hidup atau ujian pada masa yang tepat.