Tujuan dan Langkah Terlibat dalam Ujian Karyotype
Sekiranya doktor anda mencadangkan ujian karyotype untuk anda atau anak anda, atau selepas amniosentesis, apakah ujian ini? Apakah keadaan yang boleh diagnosis karyotype, apakah langkah-langkah yang terlibat dalam melakukan ujian, dan apakah batasannya?
Apakah Ujian Karyotype?
Karyotype adalah gambar kromosom dalam sel . Karyotip boleh diambil dari sel darah, sel-sel kulit janin (dari cecair amniotik atau plasenta), atau sel-sel sumsum tulang.
Apakah Keadaan Yang Boleh Diagnosis Dengan Ujian Karyotype?
Karyotip boleh digunakan untuk menyaring dan mengesahkan keabnormalan kromosom seperti Down's sindrom, dan terdapat beberapa jenis kelainan yang dapat dikesan.
Salah satunya adalah trisom yang terdapat tiga salinan satu kromosom berbanding dua. Sebaliknya, monosom berlaku apabila hanya satu salinan (bukan dua). Sebagai tambahan kepada trisom dan monosom terdapat penghapusan kromosom di mana sebahagian kromosom tidak ada, dan translocasi kromosom, di mana sebahagian dari satu kromosom dilampirkan ke kromosom lain (dan sebaliknya di translocations yang seimbang.)
Contoh trisom termasuk:
- Sindrom Down (trisomy 21)
- Sindrom Edward ( trisomy 18 )
- Sindrom Patau (trisomi 13)
- Sindrom Klinefelter (XXY dan variasi lain) - Sindrom Klinefelter berlaku dalam 1 dari 500 lelaki yang baru lahir dan kelihatan meningkat dalam kejadian
- Sindrom Triple X (XXX)
Satu contoh monosomi termasuk:
- Sindrom Turner (X0) atau monosomi X - Kira-kira 15 peratus keguguran adalah disebabkan oleh Sindrom Turner, tetapi trisomi ini hanya terdapat pada 1 pada tahun 2000 kelahiran hidup
Contoh penghapusan kromosom termasuk:
- Sindrom Cri-du-Chat (kromosom yang hilang 5)
- Sindrom Williams (kromosom hilang 7)
Translocations - Terdapat banyak contoh translocations termasuk translocation Down syndrome. Transplantasi Robertsonian cukup umum, berlaku dalam kira-kira 1 dalam 1000 orang.
Mosaicism adalah keadaan di mana beberapa sel dalam badan mempunyai kelainan kromosom manakala yang lain tidak. Contohnya, sindrom Down mosaik atau trisomi mozek 9. Trisomi penuh 9 tidak sesuai dengan kehidupan, tetapi trisomi mozek 9 boleh menyebabkan kelahiran hidup.
(Contohnya bernilai seribu perkataan. Belajar tentang perbezaan antara translocation, trisomy, dan mosaik Down mosaic .)
Bila Adakah Karyotype Selesai?
Terdapat banyak keadaan di mana karyotype mungkin disyorkan oleh doktor anda. Ini mungkin termasuk:
- Bayi atau kanak-kanak yang mempunyai keadaan perubatan yang mencadangkan kelainan kromosom yang belum didiagnosis.
- Orang dewasa yang mempunyai tanda-tanda gejala kelainan kromosom (contohnya, lelaki dengan penyakit Klinefelter mungkin tidak didiagnosis sehingga pubertas atau dewasa.) Beberapa gangguan trisomi mozek mungkin juga tidak didiagnosis.
- Kemandulan - Karyotip genetik boleh dilakukan untuk kemandulan. Seperti yang dinyatakan di atas, beberapa kelainan kromosom mungkin tidak didiagnosis sehingga dewasa. Seorang wanita dengan sindrom Turner atau seorang lelaki dengan salah satu varian Klinefelter mungkin tidak menyedari keadaan sehingga mereka menghadapi masalah ketidaksuburan.
- Ujian pranatal - Dalam sesetengah kes, seperti translocation Down syndrome, keadaan mungkin turun-temurun dan ibu bapa boleh diuji jika anak dilahirkan dengan sindrom Down. (Penting untuk diperhatikan bahawa kebanyakan masa Down syndrome bukanlah satu penyakit keturunan tetapi sebaliknya mutasi peluang.)
- Stillbirth - Karyotype sering dilakukan sebagai sebahagian daripada ujian berikut kelahiran mati.
- Keguguran berulang - Karyotype ibu bapa keguguran berulang mungkin memberikan petunjuk tentang sebab-sebab kerugian berulang yang dahsyat ini. Adalah difikirkan bahawa kelainan kromosom, seperti trisomi 16 adalah penyebab paling kurang 50 peratus keguguran.
- Leukemia - Ujian karyotype juga boleh dilakukan untuk membantu mendiagnosis leukemia, contohnya, dengan mencari kromosom Philadelphia yang terdapat pada beberapa orang dengan leukemia myelogenous kronik atau leukemia limfosit akut.
Langkah Terlibat dalam Ujian Karyotype
Ujian karyotype mungkin terdengar seperti ujian darah mudah, yang membuat ramai orang tertanya-tanya mengapa ia mengambil masa yang lama untuk mendapatkan hasilnya. Ujian ini sebenarnya agak rumit selepas pengumpulan. Mari lihat langkah-langkah ini supaya anda dapat memahami apa yang sedang berlaku semasa anda sedang menunggu ujian.
1. Sample Collection
Langkah pertama dalam melakukan karyotype ialah mengumpul sampel. Dalam bayi baru lahir, sampel darah yang mengandungi sel darah merah, sel darah putih, serum, dan cecair lain dikumpulkan. Karyotype akan dilakukan pada sel darah putih yang secara aktif membahagikan (keadaan yang dikenali sebagai mitosis). Semasa kehamilan, sampel boleh sama ada cecair amniotik yang dikumpulkan semasa amniosentesis atau sepotong plasenta yang dikumpul semasa uji sampling villi chorionic (CVS). Cecair amniotik mengandungi sel-sel kulit janin yang digunakan untuk menghasilkan karyotip.
2. Pengangkutan ke Makmal
Karyotip dilakukan di makmal tertentu yang dipanggil makmal cytogenetics - sebuah makmal yang mengkaji kromosom. Tidak semua hospital mempunyai makmal cytogenetics. Jika hospital atau kemudahan perubatan anda tidak mempunyai makmal cytogenetics sendiri, sampel ujian akan dihantar ke makmal yang mengkhusus dalam analisis karyotype. Sampel ujian dianalisis oleh ahli teknologi sitogenetik yang terlatih, Ph.D. cytogeneticists, atau ahli genetik perubatan.
3. Memisahkan Sel
Untuk menganalisis kromosom, sampel mesti mengandungi sel yang secara aktif membahagikan. Dalam darah, sel-sel darah putih secara aktif membahagikan. Sel-sel janin yang banyak juga aktif. Setelah sampel mencapai makmal cytogenetics, sel-sel yang tidak dibahagi dipisahkan dari sel pembahagi menggunakan bahan kimia khas.
4. Tumbuh Sel
Untuk mempunyai sel yang cukup untuk menganalisis, sel membahagi ditanam dalam media khas atau budaya sel. Media ini mengandungi bahan kimia dan hormon yang membolehkan sel-sel membahagikan dan membiak. Proses kultur ini boleh mengambil masa tiga hingga empat hari untuk sel darah, dan sehingga seminggu untuk sel-sel janin.
5. Menyelaraskan Sel
Kromosom adalah tali panjang DNA manusia. Untuk melihat kromosom di bawah mikroskop, kromosom perlu berada dalam bentuk paling padat dalam fasa pembahagian sel (mitosis) yang dikenali sebagai metaphase. Untuk mendapatkan semua sel ke tahap pembahagian sel khusus ini, sel-sel dirawat dengan bahan kimia yang menghentikan pembelahan sel pada titik di mana kromosom adalah yang paling padat.
6. Melepaskan Kromosom Dari Sel Mereka
Untuk melihat kromosom padat ini di bawah mikroskop, kromosom perlu keluar dari sel darah putih. Ini dilakukan dengan merawat sel darah putih dengan penyelesaian khas yang menyebabkan mereka pecah. Ini dilakukan semasa sel-sel berada pada slaid mikroskopik. Serpihan sisa dari sel darah putih dibersihkan, meninggalkan kromosom yang tersekat pada slaid.
7. Memadamkan Kromosom
Kromosom secara semulajadi tidak berwarna. Untuk memberitahu satu kromosom dari yang lain, pewarna khas yang dipanggil Giemsa pewarna digunakan pada slaid. Giemsa pewarna noda kawasan kromosom yang kaya dengan asas adenine (A) dan timin (T). Apabila berwarna, kromosom kelihatan seperti tali dengan cahaya dan jalur gelap. Setiap kromosom mempunyai pola cahaya dan gelap khusus yang membolehkan ahli sitogenetik memberitahu satu kromosom dari yang lain. Setiap jalur gelap atau cahaya merangkumi beratus-ratus gen yang berlainan.
8. Analisis
Setelah kromosom berwarna, slaid diletakkan di bawah mikroskop untuk dianalisis. Gambar kemudian diambil dari kromosom. Pada akhir analisis, jumlah kromosom akan ditentukan dan kromosom disusun mengikut saiz.
9. Mengira Kromosom
Langkah pertama analisis adalah mengira kromosom. Kebanyakan manusia mempunyai 46 kromosom. Sindrom Down mempunyai 47 kromosom. Ia juga mungkin bagi orang untuk mempunyai kromosom yang hilang, lebih daripada satu kromosom tambahan, atau sebahagian daripada kromosom yang sama ada hilang atau diduplikasi. Dengan melihat hanya bilangan kromosom, ada kemungkinan untuk mendiagnosis keadaan yang berbeza termasuk sindrom Down.
10. Menyusun Chromosom
Selepas menentukan bilangan kromosom, ahli sitogenetik akan mula menyusun kromosom. Untuk menyusun kromosom, seorang ahli sitogenetik akan membandingkan panjang kromosom, penempatan centromeres (kawasan di mana dua kromatid disertai), dan lokasi dan saiz G-bands. Pasangan kromosom adalah nombor dari nombor terbesar (nombor 1) hingga terkecil (angka 22). Terdapat 22 pasang kromosom, yang disebut autosomes, yang sepadan dengan tepat. Terdapat juga kromosom seks, betina mempunyai dua kromosom X manakala lelaki mempunyai X dan Y.
11. Melihat Struktur
Di samping melihat jumlah kromosom dan kromosom seks, ahli sitogenetik juga akan melihat struktur kromosom tertentu untuk memastikan tiada bahan tambahan atau bahan tambahan serta ketidakstabilan struktur seperti pemindahan. Translocation berlaku apabila sebahagian daripada satu kromosom dilampirkan ke kromosom lain. Dalam sesetengah kes, dua helaian kromosom dipertukarkan (translocation yang seimbang) dan masa lain sekeping tambahan ditambah atau hilang dari satu kromosom sahaja.
12. Keputusan Akhir
Pada akhirnya, karyotype muktamad menunjukkan jumlah kromosom, jantina, dan sebarang ketidakstabilan struktur dengan kromosom individu. Gambaran digital kromosom dijana dengan semua kromosom yang disusun mengikut nombor.
Had Ujian Karyotype
Adalah penting untuk diperhatikan bahawa walaupun ujian karyotype boleh memberi banyak maklumat mengenai kromosom, ujian ini tidak dapat memberitahu anda sama ada mutasi gen tertentu, seperti yang menyebabkan fibrosis kistik , hadir. Kaunselor genetik anda boleh membantu anda memahami kedua-dua ujian karyotype yang boleh memberitahu anda dan apa yang mereka tidak boleh. Kajian lanjut diperlukan untuk menilai peranan mutasi gen dalam penyakit atau keguguran.
Ia juga penting untuk ambil perhatian bahawa pada masa-masa ujian karyotype mungkin tidak dapat mengesan beberapa kelainan kromosom, seperti ketika mozekisme plasenta hadir.
Masa depan
Pada masa sekarang, ujian karyotype dalam keadaan pranatal agak invasif, memerlukan amniosentesis atau sampel sampingan villi chorionic. Kajian sedang dijalankan menilai DNA bebas sel dalam sampel darah ibu sebagai alternatif yang kurang invasif untuk diagnosis pranatal keabnormalan genetik dalam janin.
Bottom Line pada Menunggu Keputusan Karyotype Anda
Semasa menunggu hasil karyotype anda, anda mungkin merasa sangat cemas, dan minggu atau dua yang diperlukan untuk mendapatkan hasil yang dapat dirasakan seperti eon. Ambil masa untuk bersandar pada rakan dan keluarga anda. Mempelajari beberapa keadaan yang berkaitan dengan kromosom yang tidak normal juga boleh membantu. Walaupun banyak keadaan yang didiagnosis dengan karyotype boleh memudaratkan, terdapat banyak orang yang hidup dengan keadaan ini yang mempunyai kualiti kehidupan yang sangat baik.
> Sumber
- > Kumar, Vinay, Abul K. Abbas, dan Jon C. Aster. Robbins dan Cotran Dasar Penyakit Pathologi. Philadelphia: Elsevier-Saunders, 2015. Cetak.
- > Norton, M., dan B. Rink. Menukar Indikasi untuk Ujian Invasif dalam Era Peningkatan Peningkatan. Seminar dalam Perinatologi . 2016. 40 (1): 56-66.
- > Shah, M., Cinnioglu, C., Maisenbacher, M., Comstock, I., Kort, J., dan R. Lathi. Perbandingan Cytogenetics dan Karyotyping Molekul untuk Ujian Chromosom terhadap Spesimen Keguguran. Kesuburan dan Kemandulan . 2017. 107 (4): 1028-1033.